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超聲波脫氣：將配制好的流動相連容器放入超聲清洗器水槽中脫氣10～20min。這種方法比較簡便，又基本上能滿足日常分析操作的要求，所以，目前仍廣泛采用。這種方法只能除去30%的溶解氣體，有時還會引起氣體溶解度的增加。對氧敏感的檢測器不宜用此法。超聲波脫氣比較好，10~20分鐘的超聲處理對許多有機溶劑或有機溶劑/水混合液的脫氣是足夠了（一般500ml溶液需超聲20~30min方可），關(guān)于超聲波脫氣時間問題眾說紛紜，各實驗室內(nèi)5～30分鐘不等，一般來說流動相組成為無機（緩沖鹽溶液）時，5～15分鐘即可，流動相為是水和有機容積混合時，超聲脫氣時間要相對長一些，這個方法只能除去30%的溶解氣體，時間的延長不和效果成正比，且其中氣泡對色譜峰基線穩(wěn)定性與信噪比有一定影響，一般來說影響不大，15min超聲即可足夠。此法不影響溶劑組成。使用超聲清洗器脫氣時應(yīng)注意避免溶劑瓶與超聲波清洗器槽底部或壁接觸，以免玻璃瓶破裂，容器內(nèi)液面不要高出水面太多。

有機相超聲脫氣時溫度控制很關(guān)鍵。多數(shù)有機溶劑在超聲過程中會發(fā)熱，溫度過高可能改變?nèi)芤盒再|(zhì)或引發(fā)危險。建議將超聲波清洗儀溫度控制在25-30℃之間，對于易揮發(fā)或易燃的有機溶劑更應(yīng)嚴(yán)格控制。若超聲波清洗儀器無溫控功能，可采用間歇超聲工作方式，避免溶液過熱。流動相超聲波清洗儀器脫氣需要蓋蓋子嗎？超聲處理時蓋子的松緊程度直接影響實驗安全與效果。流動相超聲時，建議將蓋子輕輕擰上但不要完全擰緊，留出適當(dāng)縫隙。這樣既能防止溶劑揮發(fā)，又能避免超聲波產(chǎn)生的壓力導(dǎo)致容器破裂。有機相超聲同樣需要蓋蓋子，但同樣不宜擰得過緊，尤其是揮發(fā)性較強的有機溶劑更需注意。